云顶集团

D-云顶集团在临床应用中常见问题的探讨

近年来,D-二聚体已被广泛认为是体内交联纤维蛋白水解的标志性产物。它具有较高的敏感性和阴性预测能力,在深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)的诊断,弥散性血管内凝血(DIC)的诊断和溶栓治疗的监测中具有良好的临床应用价值。值。尽管D-二聚体的检测已经普及,但在D-二聚体的实际应用中,对检测参数仍存在一些误解,这使得实验室难以对临床结果提供合理的解释。由于不同的研究对测试结果的差异缺乏足够的了解,使得各部门的质量管理产生了混乱。 TR 一、不同试剂检测结果不可比性D-云顶集团的基本原理基于抗原 - 抗体反应。自Rylatt等人。 1983年首次报道了D-二聚体单克隆抗体,已开发出20多种D-二聚体单克隆抗体。已经使用了超过30种测定和超过20种单克隆抗体。由于方法原因,通过不同试剂测定同一样品中的D-二聚体浓度通常是不可比的。主要原因是: 1.单克隆抗体不同这里应该注意的是,我们通常称之为“D-二聚体”的不是循环中简单而均匀的结构,而是含有D-二聚体结构的不同大小片段的混合物(如DD,DY,XD) ,XY,DXD,YXD,DXXD等,分子量为190KDa-720KDa)。针对不同片段制备的单克隆抗体对相同血浆的不同片段也具有不同的结合能力。目前没有国际公认的标准单克隆抗体,也没有统一的参考方法。此外,用于自动凝固仪器的免疫比浊测定也受到胶乳颗粒特性的影响。每种试剂的制造商选择胶乳颗粒的大小,并且组合单克隆抗体的能力也不同,并且反应后的吸光度特性也不同。单克隆抗体特异性和试剂生产过程的差异导致在试剂之间检测D-二聚体缺乏可比性。 TR 2.报告结果缺乏统一的标准单位D-云顶集团的报告单位通常包括纤维蛋白原当量单位(FEU)和D-二聚体单位(DDU)。 FEU是由预降解的纤维蛋白原分子的量表示的D-二聚体的量,因此,FEU表达的D-二聚体的量相当于DDU表达的约1.7-2.0倍。 D-二聚体报告模式中还包括ng/mL,ug/mL和mg/L.制造商提供的装置通常应直接使用,不建议改变形状和尺寸。 TR3.参考区间不同试剂说明书中各试剂生产商提供的参考时间间隔,方法学和单克隆抗体因子除外,通常选择的受试者也不同,特别是进口试剂,种族,性别,年龄和生理学的差异和其他方面可能导致不同的统计结果。在试剂规范中直接应用参考区间通常会导致一些无法解释的现象甚至误导临床应用。 TR 4.校准品不同由于每种试剂中使用的抗体不同,因此相应的校准品不同。目前的校准物包括消化交联的纤维蛋白凝块后的血浆,部分纯化的D-二聚体产物和高分子量纤维。蛋白质寡聚体产品等。制造商选择适合其产品的校准器,但一种校准校准器不适用于其他品牌的试剂。因此,没有用于D-二聚体测定的参考标准,并且方法之间校准的可能性低。 。 TR 目前,国内医学实验室使用的D-二聚体分析系统主要包括西门子,Beckman-Coulter,Sidaco,罗氏,日本水等,以及国内一些试剂。可比性低,参考值和报告单位不同。虽然我国在不同的系统中有一些系统的报告,但结果不同,缺乏一般的指导意义。一些实验室使用两个D-云顶集团系统进行标本测定,由此产生的差异不仅会导致临床诊断混乱,还会给实验室质量管理带来困惑。解决方案是在实验室中仅使用一个D-云顶集团系统。如果有两个检测系统,则应分别制定不同系统的参考区间和所提供的服务组的临界值,并向诊所解释。 TR 二、参考区间与cutoff值如前所述,由于D-云顶集团方法和所用抗体的差异,实验室需要建立自己的参考区间和截断值,以排除深静脉血栓形成和肺栓塞。参考区间的建立相对容易,它反映了当地健康人群中D-二聚体的水平。截止值的建立更复杂。它反映了怀疑患有DVT和PE的患者是否具有DVT和PE的临界值。外国通常采用以下步骤建立:1。在不同地区建立样本采集点; 2.在临床收集疑似患有DVT和PE的患者样本,样本量至少为300或以上,包括25%被诊断为PVT或PE的患者; 3.患者选择,使用Wells Pretest Probability PTP评估规则和影像学研究,以及阴性患者进行为期三个月的随访,以确定是否存在DVT或PE; 4.消除预防或抗凝治疗的患者和孕妇; 5.对所有选定的疑似患者进行同时D-云顶集团和成像检查; 6.将D-二聚体测试结果作为接收器操作特性(ROC)曲线并确定截止值。目前,尚未有关于建立中国D-云顶集团截止值的官方报告。鉴于样品采集的难度,CLSI(美国临床实验室标准协会)建议为试剂制造商提供由权威机构(例如FDA)验证的截止值(CLSIH59-P)。 TR值得注意的是,D-云顶集团的截止值仅用于排除DVT和PE,而不是用于区分健康人和非健康人;参考区间是判断D-和DVT和PE以外的其他疾病。二聚体异常的参考指标。截止值可以低于或高于或等于参考间隔的上限,这可能导致临床医生的混淆。因此,CLSI建议在报告测试结果时,如果仅针对DVT和PE,则仅报告截止值。如果用于诊断和监测其他疾病,则报告参考区间;然而,许多实验室通常不知道何时使用D-云顶集团来诊断DVT和PE,以及何时将其用于诊断和监测其他疾病。建议临床报告两者,并向诊所解释各自的用途。 TR 此外,还有一些健康人D-二聚体升高,如孕妇和65岁以上的老年人。 TR 特别是在孕妇中,怀孕期间同时激活凝血和纤维蛋白溶解系统可导致血浆D-二聚体水平升高。使用常规参考区间和截止值作为D-二聚体异常的参考指标可能误导临床诊断和治疗。因此,应该为这些“特殊人群”重新建立参考区间和截止值。 TR 三、临床应用价值
1. DVT和PE的排除D-二聚体测定的最大临床价值是排除DVT和PE。目前,联合临床预测试概率用于同时检测患者的D-二聚体浓度以排除DVT和PE。当PTP被评估为低和中等风险时,D-云顶集团截止值是负的(<0.5mg/LFEU),可以排除DVT和PE,不需要进一步的成像检查; PTP评估风险高,D-云顶集团截止值为阳性(> 0.5mg/LFEU),不能排除血栓性疾病,提示血栓,DVT,PE,DIC等的可能性,需要进一步检查。虽然血管造影是诊断DVT和PE的“黄金标准”,但其检查成本相对较高,并且具有侵入性损伤,并且还受到医院医疗水平的限制。也可以选择肺动脉造影和超声检查,但不能作为常规检查。与血管造影和超声检查相比,D-二聚体更简单,更方便,更便宜,特别适用于门诊患者的常规筛查。国外研究表明,D-云顶集团结合PTP可以保护30-35%怀疑患有DVT/PE的患者免于进一步检查,从而减少不必要的疼痛和费用。 TR目前市场上有多种检测D-二聚体的试剂,大致可分为两类,一类以欧美产品为代表,主要用于DVT/PE排除筛选;另一种是基于日本产品的代表,主要用于DIC诊断。前一种试剂的特征在于高灵敏度和相对窄的检测范围。有第三个证明的截止值(通常为500μg/L或0.5mg/LFEU),阴性预测值高于98%;后者的特点是灵敏度相对较低,检测范围较宽(如表1所示)。

美国临床实验室标准协会(CLSI)H59-P推荐指南明确规定了排除静脉血栓栓塞(VTE)D-二聚体的标准,并要求在试剂文件中进行鉴定。是排除或协助诊断VTE。例如,西门子生产的InnovanceD-Dimer试剂配备了Sysmex自动凝固分析仪,已通过FDA认证(FDA-510k),并已于今年在中国成功注册并得到推广。验证结果表明,该试剂主要用于排除DVT和PE,其截止值为0.5mg/LFEU。 SysmexCA系列凝血分析仪的检测灵敏度和阴性预测值均大于99%,检出范围为0.19-35.20mg/L. ,完全符合CLSI要求。最近,中国也在制定D-二聚体试剂的国家标准。讨论草案规定D-云顶集团应结合临床诊断的预测试概率进行,阴性预测值应不低于95%;该范围覆盖制造商提供的临床标本测量值的1/2至4倍,以排除诊断阈值; D-二聚体试剂在测试范围内应具有大于0.98的线性相关系数。 TR 2. DIC的诊断大量临床实践证明,D-二聚体在DIC作为继发性纤维蛋白溶解的标记物质的诊断和病程监测中具有良好的应用价值。 DIC是一种复杂的病理生理过程和严重的后天性系统性血栓形成 - 出血综合征。其特征在于体内凝血和抗凝血机制的不平衡,导致弥漫性小血管内血栓形成和继发性纤维蛋白溶解。 D-二聚体在DIC形成的早期阶段升高,并且随着疾病的进展,D-二聚体可以增加10倍以上。因此,D-二聚体可以作为DIC早期诊断和疾病监测的主要指标。此外,同时测定D-二聚体和FDP可以大大提高其诊断效率。 TR3. 溶栓治疗的监测国内外学者均报道D-二聚体可作为血栓性疾病溶栓治疗的特异性监测指标。在溶栓治疗中,D-二聚体含量通常具有以下特征:1 D-二聚体含量在溶栓后短期内显着增加,然后逐渐减少,表明治疗有效;溶栓后2 D-二聚体体内容物继续上升或下降缓慢,表明溶栓药物的量不足;应继续3次溶栓治疗,直至D-二聚体含量降至正常范围。正常D-二聚体的恢复是停止溶栓的指示。应该注意的是,D-二聚体峰值变化的时间随着溶栓治疗对于不同疾病而变化。 D-二聚体在急性心肌梗塞和脑梗塞后1至6小时达到峰值,并在24小时后降至溶栓前的水平。在DVT溶栓中,D-二聚体的峰值经常在24小时或更晚出现。对于慢性DVT患者,溶栓前D-二聚体含量高于正常值,溶栓后D-二聚体含量未增加,或迅速降至正常范围,表明仅发生少量新鲜血栓形成此时。大多数老年人,血栓性血栓形成,溶栓治疗往往得不到满意的效果。此外,在溶栓治疗结束后,应定期观察D-二聚体的变化,以防止血栓复发。 TR 四、D-二聚体应用的局限性临床实践发现,既往血栓形成患者的D-二聚体水平低于新发血栓形成患者,且小血栓中D-二聚体水平低于大血栓。因此,存在一些具有亚临床或阴性D-D结果的长期小血栓。 D-二聚体监测对远端血栓形成的敏感性低。高滴度类风湿因子,雌激素疗法,卵巢癌肿瘤标志物CA125等可导致D-二聚体水平的错误增加。由于D-云顶集团的低特异性(即对疾病的诊断特异性),在大多数情况下,它只能用作二级诊断或筛选程序。近年来,对D-二聚体阳性结果,临床结果和预后价值的研究大多是回顾性分析。样本量小,定量分析小,不通用。尽管国内D-二聚体的检测呈现快速增长,但仍存在许多与方法学,质量控制,标准化和临床应用相关的问题,这需要我们进行深入研究。